Universidad Metropolitana

Biología Molecular

Manual de Diagnóstico Molecular Clínico

Presentación del Manual

Propósito: Establecer lineamientos técnicos y de control de calidad para el análisis de ADN y ARN en el laboratorio clínico.

Alcance: Aplicable a muestras procesadas en Bioquímica, Hematología, Patología y Genética Molecular.

Principio clave: El diagnóstico molecular integra clínica, laboratorio e imágenes diagnósticas.

Módulo I – Toma y Manejo de Muestra

  • Sangre periférica
  • Tejido fresco o parafinado
  • Hisopados
  • Líquido cefalorraquídeo
  • Médula ósea

Crítico: Rotulación correcta, cadena de frío y evitar contaminación cruzada.

Módulo II – Extracción y Aislamiento

ADN: Lisis celular, digestión proteica, precipitación, lavado y resuspensión en Buffer TE.

ARN: Trabajo libre de RNasas, uso de TRIzol o columnas, eliminación de ADN contaminante.

Módulo III – Control de Calidad

Cuantificación por absorbancia a 260 nm.

ADN A260/A280 ≈ 1.8 | ARN ≈ 2.0

Módulo IV – Integridad

Electroforesis en gel para verificar integridad de ADN y ARN.

Módulo V – Análisis Molecular

PCR, RT-PCR, qPCR, electroforesis y secuenciación.

Módulo VI – Correlación Diagnóstica

Integración de resultados moleculares con clínica, bioquímica, hematología e imágenes.

Representación Visual – Vía de las Pentosas Fosfato